高通量测序(NGS)可以分为文库构建、测序、数据分析三个关键流程,其中文库构建是基础环节,为后续测序提供高质量的DNA/RNA片段,文库的质量直接影响测序质量与数据分析。
如下图所示,常规NGS建库流程为DNA打断→末端修复→3‘端加A→接头连接→PCR,T4 DNA polymerase在末端修复过程中通过5’端聚合酶活性和3’端外切酶活性将片段化DNA平端化,T4 DNA polymerase的质量直接决定了建库产量和质量。
百力格新品—BioZues® T4 DNA Polymerase强势来袭!
1. 超高纯度:HPLC纯度>99%;
2. 超高残留物质控制:无DNA内切酶、外切酶残留、超低宿主核酸残留;
3. 优良的批间差控制:建库产量批次一致性波动CV<5%;
4. 高性价比:与某国际一线品牌对标,使用50%左右投料量即可得到相同建库产量。
测试数据
1. 超高纯度,HPLC纯度>99%
对BioZues® T4 DNA polymerase产品进行HPLC检测,纯度均达到99%以上。
2. 超高残留物质控制,无DNA内切酶和外切酶残留
DNA内切酶残留检测,取50 U BioZues® T4 DNA polymerase与质粒DNA 37°C孵育,琼脂糖凝胶电泳观察DNA条带变化。
DNA外切酶残留检测,取50 U BioZues® T4 DNA polymerase与线性DNA 37°C孵育,琼脂糖凝胶电泳观察DNA条带变化。
3. 优良的批间差控制,建库产量批次一致性波动CV<5%;
名称 | 第1批次 | 第2批次 | 第3批次 | 平均值 | 标准偏差 | CV值(%) |
浓度ng/ul | 93.8 | 95 | 93 | 93.93333 | 1.006645 | 1.07% |
总量ng | 2814 | 2850 | 2790 | 2818 | 30.19934 |
不同批次BioZues® T4 DNA polymerase进行NGS文库构建,建库产量差异CV<5%。
4. 高性价比,与某国际一线品牌对标,使用50%左右投料量即可得到相同建库产量。
相同浓度下(25 U/μl),在使用酶切建库试剂盒建库时,BioZues® T4 DNA Polymerase投料量为A公司1/2,即能得到相同的建库产量、捕获效率、测序深度、嵌合体率
名称 | A公司 | BLG |
使用量 | 2 n | 1 n |
浓度ng/ul | 58.4 | 58.6 |
总量ng | 1635.2 | 1640.8 |
BLG和A公司T4 DNA polymerase酶切建库对比
★★★产品信息★★★
名称 | 货号 | 产品应用 | |
T4 DNA聚合酶 | BioZues® T4 DNA Polymerase | SE0801 | 末端修复 |
T4 DNA连接酶 | BioZues® T4 DNA Ligase | SE0601 | 分子克隆、酶切连接 |
BioZues® T4 DNA Ligase (Rapid) | SE0602 | 超低自连率、接头连接 | |
T4 GP32蛋白 | BioZues® T4 GP32 | RP0101 | 稳定单链结构 |
T4 磷酸激酶 | BioZues® T4 PNK | SE0901 | 片段和接头磷酸化修饰 |
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