水是生命之源,各种生理生化反应多是基于溶液环境,高品质的实验用水是现代分子生物学实验的重要基石。作为分子细胞生物学必备选项:DEPC水和无酶水在实验中最常见是用于分子诊断反应,如各种PCR反应体系、RNA沉淀的溶解、反转录体系、siRNA的退火反应以及细胞试剂buffer配置等,除此之外,无酶水及DEPC水适用于各种要求无RNase、DNase和Proteinase的反应体系建立:如基因编辑体系等。
作为容易被忽视的组分,通常在实验出现问题时,大家也很少会将“水”作为重要的影响因素进行分析,但是实际上“水”恰恰是关键点!您是否也在实验过程中遇到以下情况?
1. 水中杂质残留导致PCR扩增产物出现杂带或扩增受到抑制
图1. 低品质水配置buffer扩增图(左图),高品质水配置buffer扩增产物均一,产量丰富(右图)
2. 水中核酸残留导致检测结果的假阳性
图2. 高品质水配置为绿色基线,红色为低品质水出现非特异扩增
3. 水中杂质残留导致qPCR非特异性扩增
图3,高品质水配置buffer QPCR扩增标曲均一(左图),低品质水导致较早出现非特异例如红色扩增曲线(右图)
4. 内毒素含量过高导致细胞死亡、抑制细胞增殖或者干扰细胞过程;
图4 低品质水配置试剂 培养细胞可导致细胞状态差甚至污染(左图),高品质水配置试剂培养细胞状态健康(右图)
5. 水中的RNA酶,DNA酶对实验体系中的RNA,DNA成分的酶解作用
图5. 低品质(左图)/高品质(右图)DEPC水配置试剂对gRNA稳定性影响:同一gRNA粗品在不同品质DEPC水中冷藏存储1天后的HPLC纯度对比,提示酶解作用的发生。
不同品质的水实验结果可是会大相径庭,水质的影响因素大家可以从如下方面进行考量:
Ø 重金属残留对酶活影响;
Ø 水中的核酸残留导致检测结果的假阳性;
Ø 微生物残留造成实验体系污染,改变基因表达调控趋势;
Ø 内毒素含量过高导致细胞死亡、抑制细胞增殖或者干扰细胞过程;
Ø 水质的RNA酶,DNA酶对实验体系中的RNA,DNA成分的酶解作用等……
所以要求好的无酶水或DEPC水除了不降解DNA/RNA外,还需要对下游实验应用场景的影响最小化,最好能够做到无影响。为此,百力格推出的高品质无酶水或DEPC水,严格按照《中国药典》中对纯化水的要求,进一步加强高品质水的无酶、无菌、无核酸,无重金属等的制备工艺优化处理,同时在基本检项的基础上,增加核酸残留检测、内毒素含量检测、无菌检测与重金属离子检测,助您实验无忧!
百力格DEPC水质检项:
常规质检项 | 百力格DEPC水质检项 | 重要性 |
外观目视检查 | 目视检测 | - |
RNA酶活性 | RNA酶残留检测 | 防止RNA降解 |
核酸外切酶活性 | DNA外切酶残留检测 | 防止DNA降解 |
非特异性核酸内切酶活性 | 非特异性DNA内切酶残留检测 | 防止DNA降解 |
★核酸残留★ | 1. 残留的核酸可能会严重干扰PCR结果,导致检测结果的假阳性或背景值较高,进而造成实验信息的误判; 2. 残留的宿主细胞核酸可能会在活体细胞内造成细胞增殖异常改变,或导致遗传毒性产生。 | |
★内毒素含量★ | 1. 影响细胞实验:内毒素可以激活免疫细胞,诱导多种细胞因子的释放,从而改变基因非预期表达,抑制细胞增殖,甚至导致细胞死亡。 2. 干扰细胞正常扩增过程,如DNA和RAN合成和蛋白质表达,从而影响实验结果。 | |
★微生物限度/无菌检测★ | 1. 造成实验室微生物污染,如细胞培养中造成细胞死亡; 2. 危害实验体系建立,甚至导致交叉污染,影响实验人员健康。 | |
★重金属离子残留★ | 导致核酸、蛋白质构像改变,干扰氧化磷酸化及渗透性平衡,特别是对离子敏感的分子生物学实验过程中的酶活效应。 |
同时百力格的高品质水对比国际知名品牌同类型产品进行如下多种功能测试,可以达到并部分超过相关产品性能要求。
1.BLG-DEPC水NGS建库性能测试
如图所示为250 ng基因组酶切建库三次性能测试图,百力格DEPC水在建库峰型和产量上均有优异表现。
2. BLG- DEPC水进行siRNA保存性能测试
如图所示为不同批次产品测试,百力格高品质DEPC水对RNA具有良好的保存稳定性。
3. BLG- DEPC水DNA与RNA酶解测试
BLG-高品质无酶水/DEPC水能够有效保证实验精度、灵敏度、可重复等关键参数实验需求,为您的实验保驾护航!
★★★产品信息★★★
产品名称 | 产品编号 | 产品规格 | 单位 |
DEPC-Treated Water (DNase/RNase free ) | SDW0101-001 | 1 ml x 5 | 管 |
SDW0101-100 | 100 ml | 瓶 | |
SDW0101-500 | 500 ml | 瓶 | |
Nuclease-free Water(not DEPC-treated) | SDW0201-001 | 1ml x 5 | 管 |
SDW0201-100 | 100ml | 瓶 | |
SDT0201-500 | 500ml | 瓶 | |
Low TE Buffer | SDT0301-001 | 1ml x 5 | 管 |
SDT0301-100 | 100ml | 瓶 |
*更多需求请咨询当地销售人员。